上海通蔚生物讓您的實驗省時省力更省心,為更好的為您服務,我們產品銷往全國各個地區,為您提供專業、耐心的服務,我們專業,所以值得信賴,歡迎來詳詢我司。細胞系劃痕實驗是觀察掌握細胞系遷移實驗過程中細胞系活動的重要實驗方法,
問題一:細胞系劃痕實驗為什么這么重要
答:因為細胞系劃痕實驗是觀察細胞系遷移活動的重要技術手段,而且簡單快捷、經濟實惠(劃重點!)。
問題二:細胞系劃痕實驗為什么一般選擇6孔板
答:因為6孔板大小適中,可保證有相當距離的平直劃痕,便于觀察;當然若是需要高通量初篩時,也可以用12或者24孔板。
問題三:為什么細胞系接種密度要求過夜100%融合
答:如果過夜后細胞系=沒有100%融合,雖然可以適當延長培養時間,但因細胞系密度已經很大,所以細胞系狀態會逐漸變差,后續細胞系可能不遷移而是凋亡。
問題四:怎樣避免細胞系增殖對細胞系遷移實驗造成的假陽性結果
答:操作如下
1、使用無血清或低血清培養基(<2%)可降低細胞系增殖對實驗結果的影響
2、一般認為24h為細胞系的一個周期,在選取合適的時間點(6,12,24h)檢測劃痕寬度時,不要超過細胞系一個周期的時間
3、如果要單純考慮細胞系遷移,可以先用(1ug/ml)處理1h,抑制細胞系的分裂。
問題五:結果怎樣拍照
答:按照6孔板背后畫線的垂直方向劃痕,可以形成若干交叉點,劃痕一次與5條定位線相交,就有10個可固定監測點,以解決了前后觀察時位置不固定的問題。
問題六:細胞系不遷移怎么回事?
答:避開細胞系狀態的影響,需要考慮細胞系自身的遷移能力,并非所有細胞系都適合劃痕實驗,以乳腺癌為例,乳腺癌細胞系MCF-7幾乎很難遷移,而MDA-MB-231具有很強遷移性。
問題七:結果統計中,細胞系計數和統計面積那個好用?
答:根據細胞系劃痕實驗的實驗結果選擇。如果細胞系遷移輪廊比較清晰,并且遷移數量不多,我們可以選擇細胞系計數;但如果細胞系數比較多,連片生長,那么統計面積比細胞系計數的方式更簡便且客觀。
問題八:細胞系劃痕技術有什么不足嗎
答:細胞系劃痕實驗的不足主要包括:
1、適用的細胞系類型范圍小,一是需要遷移強的細胞系,而且對無血清的環境有較強的忍受力(至少24h)12h細胞系凋廣就超過50%。
2、自身操作的實驗誤差,如劃痕距離不一致等。
以上是通蔚生物帶您了解實驗室中細胞系培養的方法及注意事項,您知道了嗎?上海通蔚生物將進一步加強人才培養、產品創新,持續不斷地提升企業核心竟爭力,實現具有高科技產業體系、知識化創業團隊的化大集團企業,更好、更快捷、更的服務于生命科學領域,迎接新一輪世界經濟一體化所帶來的機遇與挑戰。

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