精品一区二区三区三区-国产黄色在线-香蕉一区二区-91成人观看-www.成人网-黄色一级大片免费版-午夜影院污-黄色av大全-www.男人天堂.com-av官网在线观看-欧洲高潮三级做爰-日本一区二区三区四区视频-欧美日韩精品区-自拍偷拍99-亚洲人成电影网-农村妇女毛片-一区二区三区视频免费看-91大神福利视频-日本一区二区视频免费-污污视频网站在线

新聞中心您現(xiàn)在的位置:首頁 > 新聞中心 > ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)技巧
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)技巧
更新時間:2016-12-14   點(diǎn)擊次數(shù):1398次

在間接法和夾心法ELSIA中,陽性孔呈色深于陰性孔。在競賽法ELISA中則相反,陰性孔呈色深于陽性孔。兩類反響的成果判別辦法不一樣,分述于下。
(1)間接法和夾心法
這類反響的定性成果能夠用肉眼判別。目視標(biāo)本也無色或近于無色者判為陰性,顯色明晰者為陽性。但在ELSIA中,正常人血清反響后常可呈現(xiàn)呈色的本底,此本底的深淺因試劑的構(gòu)成和試驗(yàn)的條件不一樣而異,因而試驗(yàn)中有必要加測陰性對照。陰性對照的構(gòu)成應(yīng)為不含受檢物的正常血清或類似物。在用肉眼判別成果時,更宜用顯色深于陰性對照作為標(biāo)本陽性的目標(biāo)。
目視法簡捷明晰,但頗具主觀性。在條件許可下,應(yīng)該用比色計測定吸光值,這么能夠得到客觀的數(shù)據(jù)。先讀出標(biāo)本(sample,S)、陽性對照(P)、和陰性對照(N)的吸光值,然后進(jìn)行核算。核算辦法有多種,大致可分為陽性斷定值法和標(biāo)本與陰性對照比值法兩類。
a.陽性斷定值
陽性斷定值(cut-off value)通常為陰性對照A值加上一個特定的常數(shù),以此作為判別成果陽性或陰性的規(guī)范。
ELISA試劑盒用此法判別成果請求試驗(yàn)條件十分穩(wěn)定,試劑的制備有必要規(guī)范化,陽性和陰性的對照品應(yīng)契合必定的規(guī)范,須配用精密的儀器,并嚴(yán)厲按規(guī)則操作。陽性斷定值公式中的常數(shù)是在這特定的體系中經(jīng)過對很多標(biāo)本的試驗(yàn)查看而得到的。現(xiàn)舉某種查看HBsAg的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照品為不含HBsAg的復(fù)鈣人血漿,陽性對照品HBsAg的含量標(biāo)明為P=9±2ng /ml。每次試驗(yàn)設(shè)2個陽性對照和3個陰性對照。測得A值后,先核算陰性對照A值的平均數(shù)(NC X )和陽性對照A值的平均數(shù)(PCX),兩個平均數(shù)的差(P-N)有必要大于一個特定的數(shù)值(例0.400),試驗(yàn)才有用。3個陰性對照A值均應(yīng)≥0.5×NCX,并≤1.5×NCX,如其間之一超出此規(guī)模,則棄去,而以另兩個陰性對照從頭核算NCX;如有兩個陰性對照A值超出以上規(guī)模,則該次試驗(yàn)無效。陽性斷定值按下式核算:
陽性斷定值=NCX+0.05
標(biāo)本A值>陽性斷定值的為陽性,小于陽性斷定值的為陰性。應(yīng)留意的是,式中0.05為該試劑盒的常數(shù),只適合于該特定條件下,而不是對各種試劑均可通用。
依據(jù)以上敘說能夠看出,在這種辦法中陰性對照和陽性對照也起到試驗(yàn)的質(zhì)控效果,試劑蛻變和操作不妥均會發(fā)作"試驗(yàn)無效"的后果。
b.標(biāo)本/陰性對照比值
在試驗(yàn)條件(包含試劑)較難確保穩(wěn)定的情況下,這種判別法較為適宜。在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的A值后,核算S/N值。也有寫作P/N的,這兒的P不代表陽性(positive),而是患者(patient)的縮寫,不該誤解。為防止混雜,更宜用S/N表明。在早期的間接法ELISA中,有些作者定出S/N為陽性規(guī)范,現(xiàn)多為各種測定所沿襲。實(shí)際上每一測定體系應(yīng)該用試驗(yàn)求出各自的S/N的閾值。更應(yīng)留意的是,N所代表的陰性對照是不含受檢物質(zhì)的人血清。有的試劑盒中所設(shè)陰性對照為不含蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)含量較底的緩沖液,致使反響后發(fā)作的本底也許較正常人血清的本底低得多。因而,這類試劑盒規(guī),如N<0.05<>(或別的數(shù)值),則按0.05核算,否則將呈現(xiàn)假陽性成果。
(2)競賽法
在競賽法ELISA中,陰性孔呈色深于陽性孔。陰性呈色的強(qiáng)度取決于反響中酶物的濃度和參加競賽按捺物的量,通常調(diào)理陰性對照的吸光度在1.0-1.5之間,此刻反響zui為靈敏。
競賽法ELISA不易用自視判別成果,因肉眼很難區(qū)分弱陽性反響與陰性對照的顯色區(qū)別,通常均用比色計測定,讀出S、P和N的吸光值。核算辦法首要也有兩種,即陽性斷定值法和按捺率法。
a. 陽性斷定值法
與間接法和夾心法中的陽性斷定值法根本一樣,但在核算公式中引進(jìn)陽性對照A值,現(xiàn)舉某種查看抗HBc的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照為不含抗HBc的復(fù)鈣人血漿,陽性對照中抗HBc含量為125±1 00u/ml。每次試驗(yàn)設(shè)2個陽性對照和3個陰性對照。測得A值后,先核算陰性對照A值的平均值(NC X )和陽性對照A值的平均數(shù)(PCX),兩個平均數(shù)的差(N-P)有必要大于一個特定的數(shù)值(例如0.300),試驗(yàn)才有用。3個陰性對照A值均應(yīng)小于2.000,并且應(yīng)≥0.5×NCX并≤1.5×NCX,如其間之一超出此規(guī)模,則棄去,而以另2個陰性對照從頭核算×NCX;如有2個陰性對照A超出以上規(guī)模,則該次試驗(yàn)無效。陽性斷定值按下式核算:
陰性斷定值=0.4×NCX+0.6×PCX
標(biāo)本A值≤陽性斷定值的反響為陽性,A>陽性斷定值的反響為陰性。
b. 按捺率法
按捺率表明標(biāo)本在競賽中標(biāo)本對陰性反響顯色的按捺程度,按下式核算:
按捺率(%)= (陰性對照A值-標(biāo)本A值)×100%/陰性對照A值
通常規(guī)則按捺率≥50%為陽性,<50%為陰性。
定量測定
ELISA試劑盒操作進(jìn)程復(fù)雜,影響反響要素較多,特別是固相載體的包被難到達(dá)各個別之間的共同,因而在定量測定中,每批測驗(yàn)均須用一系列不一樣濃度的參閱規(guī)范品在一樣的條件下制造規(guī)范曲線。測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA,規(guī)范曲線的規(guī)模通常較寬,曲線zui高點(diǎn)的吸光度可接近2.0,制作時常用半對數(shù)紙,以查看物的濃度為橫坐標(biāo),以吸光度為縱坐標(biāo),將各濃度的值逐點(diǎn)連接,所得曲線通常呈S形,其頭、尾部曲線趨于平整,中心較呈直線的有些是的查看區(qū)域。
測定小分子量物質(zhì)常用競賽法,其規(guī)范曲線中吸光度與受檢物質(zhì)的濃度呈負(fù)相關(guān)。規(guī)范曲線的形狀因試劑盒所用形式的不同而略有不一樣。

上海通蔚生物科技有限公司

上海通蔚生物科技有限公司

地址:上海市金山區(qū)楓涇鎮(zhèn)環(huán)東一路65弄2號3463室

主營產(chǎn)品:酶聯(lián)免疫試劑盒,食品農(nóng)殘檢測,細(xì)胞系,培養(yǎng)基,胎牛血清

©2019 版權(quán)所有:上海通蔚生物科技有限公司  備案號:滬ICP備14033764號-3  總訪問量:1302207  站點(diǎn)地圖  技術(shù)支持:環(huán)保在線  管理登陸

在线播放黄色av | 日本中文字幕第一页 | 久久亚洲AV成人无码国产人妖 | 黄网站色视频免费观看 | 国产无套精品一区二区三区 | 欧美韩国日本一区 | 一级黄色播放 | 一级肉体全黄裸片中国 | 欧美在线视频你懂的 | 久久久成人精品 | 午夜影视网 | 欧美不卡网 | 美女扒开腿让男人 | 五月激情片 | 可以免费看毛片的网站 | 干爹你真棒插曲免费 | 欧美激情片一区二区 | 亚洲午夜久久久久久久久红桃 | 丝袜美腿一区二区三区 | 性活交片大全免费看 | 欧美脚交 | 日韩av第一页 | 国产高清精品一区二区三区 | 日本a级片视频 | 亚洲精品男人的天堂 | 国产男人天堂 | 国内精品视频一区二区三区 | 深喉口爆一区二区三区 | 污片在线看| 成人在线观看亚洲 | 激情999 | 欧美成人一区二区视频 | 欧美成人免费大片 | 日韩av不卡电影 | 亚洲av综合色区无码一二三区 | 天天成人| 国产网站免费 | 成人人人人人欧美片做爰 | 午夜精品一区二区三区免费视频 | 欧美人吸奶水吃奶水 | 香蕉视频官网 | 91精品国产综合久久福利 | 99热91| 91官网入口 | 国产高清在线免费观看 | 欧美69精品久久久久久不卡 | 一区二区三区视频在线 | 香蕉视频免费 | 韩国黄色网 | 日日爱夜夜操 | 免费一级黄 | 亚洲v在线| 特黄av| 一二区在线视频 | 国产国语videosex另类 | 9久久9毛片又大又硬又粗 | 91大神一区二区 | 伊人自拍 | 国产1区在线 | 日韩精品色哟哟 | 成人久久网 | 久久久久网| 久草视频免费在线 | av毛片精品 | 日韩亚洲欧美一区 | 日韩视频在线观看免费 | 一区二区三区在线免费观看视频 | 中文字幕91在线 | 在线视频国产一区 | 亚洲精品国产熟女久久久 | 中文字幕一区在线 | 国产亚洲欧美一区二区三区 | 亚洲精品乱码久久久久久写真 | 亚洲精品亚洲人成人网 | 国产精品网站视频 | 久久精品欧美一区二区三区麻豆 | 黄色免费网页 | 在线亚洲色图 | 在线观看免费的av | 艳妇臀荡乳欲伦交换在线播放 | 国语对白真实视频播放 | 一个色综合网 | 美梦视频大全在线观看高清 | 5个黑人躁我一个视频 | 亚洲福利一区 | 精品国产乱码久久久 | 噜噜视频 | 亚洲熟妇丰满大屁股熟妇 | 在线观看的黄色网址 | 日韩成人中文字幕 | 特大黑人娇小亚洲女 | 肉色超薄丝袜脚交一区二区 | 黄色片在线 | 国产精品伦一区二区三级视频 | 3d动漫啪啪精品一区二区中文字幕 | 色综合久 | 欧美成人一区二免费视频软件 | たちの熟人妻av一区二区 | 日本色图片 | av男女| av青青草原 | 成人午夜精品无码区 | 日本内谢少妇xxxxx少交 | 久久阁| 啪啪自拍视频 | 草草影院地址 | 91亚州 | 91avcom| 国产欧美日韩三区 | 香蕉视频18 | 久久久免费观看视频 | 韩国伦理中文字幕 | 日韩播放 | 日韩不卡在线播放 | 美日韩免费视频 | 懂色av一区二区夜夜嗨 | 永久在线| 男女一区二区三区 | 欧美成人精品激情在线视频 | 久久久久久久久久影院 | 67194少妇| 免费看成人aa片无码视频羞羞网 | 最新国产露脸在线观看 | 免费吸乳羞羞网站视频 | 美女视屏 | 亚洲精品成a人 | 日韩中文字幕一区 | 美女又爽又黄视频毛茸茸 | 在线看国产 | 欧美黄色大片免费观看 | 久久成人乱码欧美精品一区二区 | 精品国产乱码久久久久久浪潮 | 色综合狠狠操 | 肉丝超薄少妇一区二区三区 | 乱精品一区字幕二区 | 99热这里 | 亚洲情侣在线 | 亚洲av人人夜夜澡人人 | 中国一级特黄真人毛片免费观看 | jizz欧美性23 | 草草在线观看 | 亚洲天堂影视 | 午夜激情综合 | 欧美乱码精品一区二区三区 | 1区2区3区视频 | 久久精品国产亚洲av蜜臀色欲 | 三级影片在线免费观看 | 手机在线观看日韩av | 在线观看免费视频 | 国产女同视频 | 成人av中文解说水果派 | 在线观看欧美精品 | 91看片网站 | 女同激情久久av久久 | 老司机免费视频 | 校园激情av | 综合中文字幕 | 一区二区 中文字幕 | 曰本不卡视频 | 日韩在线观看一区 | 日本xxxx裸体xxxx | 国产a v一区二区三区 | 天天射天天射天天射 | 欧洲熟妇的性久久久久久 | 在线中文字幕日韩 | 欧美日韩在线观看视频 | 久草视频2 | 国产一二三级 | 国产高潮久久久 | 脱女学生小内内摸了高潮 | 特黄级 | 自拍偷拍视频网 | www.婷婷| 丁香婷婷久久久综合精品国产 | 国产精品不卡 | 超碰人人草| 日日爱夜夜操 | 日本人和亚洲人zjzjhd | 激情久久av一区av二区av三区 | 美女午夜激情 | 欧美成人精品一区二区综合免费 | 欧美人体一区二区 | 久久人人爽人人 | 外国电影免费观看高清完整版 | 少妇人妻一区 | 国产又黄又猛 | 欧美成人精品欧美一级乱黄 | 波多野结衣在线电影 | 91精品国产成人www | 天天做夜夜操 | 咪咪色图 | 2021亚洲天堂 | 国产h视频在线 | 熟睡侵犯の奶水授乳在线 | 麻豆国产原创 | 香蕉视频在线观看视频 | 欧美激情喷水 | 伊人中文字幕在线观看 | 91在线成人 | 久久曹 | 98久久 | 国产乱人乱精一区二视频国产精品 | 国产福利在线观看视频 | 中国女人内谢69xxxxⅹ视频 | 黄色大片免费网站 | 亚洲色图欧美激情 | 男人天堂网在线 | 99久久久无码国产精品衣服 | 亚洲自拍中文 | 中文字幕综合在线 | 韩国伦理中文字幕 | 亚洲永久无码精品 | 亚洲中文字幕无码爆乳av | 女人被狂躁c到高潮 | 国产精品午夜福利 | 超碰v| 二十四小时在线更新观看 | 成人免费高清 | 黄色高清视频 | 一级久久久久久 | 男女视频免费网站 | 国产老熟妇精品观看 | 一区二区精彩视频 | 国产区在线看 | 精品欧美在线观看 | 91手机在线播放 | 国产999在线观看 | 国产精品美女久久久久久久 | 国产高清99 | 两个小y头稚嫩紧窄h文 | 草久久久久 | av专区在线| 桃谷绘里香在线观看 | 狠狠五月婷婷 | 成人精品免费在线观看 | 一级片在线免费看 | 久久尤物视频 | 午夜在线看| 成人免费在线观看 | av中字在线 | 日韩美女视频网站 | 中日韩精品视频在线观看 | 国产亚洲色婷婷久久99精品91 | 在线视频日韩 | 影音先锋成人资源网站 | 91精品视频在线看 | 五月婷婷色丁香 | 在线久草 | 国产精选91| 欧美激情一区二区视频 | 九九色综合网 | 国产精品视频在线看 | 日韩精品欧美精品 | 色妹子综合 | 色哟哟一区 | 少妇精品久久久久www | 亚洲综合五月 | 国产精品久久 | 99久久精品日本一区二区免费 | 奶水旺盛的女人伦理 | 天堂中文视频在线 | 成人国产在线观看 | 性生交大片免费看 | 黑人巨大精品欧美 | 天天射天天爽 | 手机av中文字幕 | 秋霞成人午夜伦在线观看 | 国产寡妇亲子伦一区二区三区四区 | 久久久夜| 一级α片免费看刺激高潮视频 | 国产成人99| 操人在线观看 | 亚洲欧美日韩一区二区三区四区 | 日本污视频在线观看 | 色噜| 91中出| 免费av免费观看 | 亚洲小视频在线观看 | 精品美女 | av福利片 | 91视频第一页 | 一级在线观看 | 韩日一级片 | 天堂色播| 涩涩成人 | 伦理片波多野结衣 | 国产无遮挡免费观看视频网站 | 日本不卡一区视频 | 我爱52av| 亚洲精品美女网站 | 成人高潮片| 美国福利片 | 影音先锋成人资源 | 69av网| 精品一区二区视频 | 美女露胸软件 | 欧美1页 | 蜜桃视频在线观看一区二区 | 日韩黄视频 | 亚洲永久精品视频 | 精品国产乱码久久 | 久久成人精品一区二区 | 特黄级 | 免费看国产曰批40分钟粉红裤头 | 久久精品国产亚洲AV黑人 | 成人国产片女人爽到高潮 | 天堂中文资源在线 | 婷婷激情影院 | 午夜免费福利在线观看 | 熟女高潮一区二区三区视频 | www.亚洲一区二区三区 | 欧美日韩精品一区 | 一区二区三区在线免费播放 | 欧美日韩中文国产 | 日本黄色免费视频 | 一区二区在线观看av | 国产原创视频在线观看 | 久久久久久久久福利 | 97人妻一区二区精品视频 | 一级片黄色的 | 亚洲熟妇av乱码在线观看 | 日韩久久久久久久久久久 | 成人在线你懂的 | 黄色片a | 国产精品1234区 | 给我看高清的视频在线观看 | 国产二区av| 欧美一区二区国产 | 久久久久久久久久久久 | 黄色大片网 | www.成人在线观看 | 丝袜调教91porn | 国产经典久久 | 国产99999| 婷婷久久丁香 | 国产乱来视频 | 亚欧日韩av | 日日摸夜夜添狠狠添久久精品成人 | 69国产视频| 日韩毛片中文字幕 | 五月天激情视频在线观看 | 91精品在线观看入口 | 97人人干 | 欧洲亚洲成人 |